期刊简介

               中华医学会主办。本刊辟有述评、专家论坛、论著、短篇论著、新技术与新方法、临床经验、中医中药、皮肤外科、病例报告、皮肤科教程、药物与临床等原创性论文栏目,是了解中国在皮肤性病学预防和治疗、临床和实验研究工作最新进展的窗口。内容丰富,报道及时,具有指导性和实用性。                

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  • 杂志名称:中华皮肤科杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:0412-4030
  • 国内刊号:32-1138/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:2002年获第三届中国科协优秀科技期刊二等奖期刊收录:上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 农业与生物科学研究中心文摘, 国家图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CA 化学文摘(美), 维普收录(中), 万方收录(中)
中华皮肤科杂志2018年第02期

氨基酮戊酸光动力疗法对鳞状细胞癌细胞株A431蛋白激酶D1及其磷酸化位点的影响

顾静;王付亮;王来群;刘保国;周萌;苗国英;李小静

关键词:光化学疗法, 氨基酮戊酸, 肿瘤, 鳞状细胞, 蛋白激酶类, 原代细胞培养, A431细胞
摘要:目的 研究氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)对皮肤鳞状细胞癌A431细胞蛋白激酶D1(PKD1)的影响,探讨ALA-PDT诱导A431细胞凋亡的机制.方法 体外培养A431细胞,用CCK-8法检测筛选出抑制作用强的ALA浓度和光动力照射(PDT)剂量组合.将对数期生长A431细胞随机分为不予任何干预的对照组、ALA组、PDT组及ALA-PDT组,观察4组细胞接受相应干预12、24、36、48 h后细胞增殖抑制率和增殖抑制作用强时间点的凋亡率.反转录PCR检测ALA-PDT作用A431细胞不同时间点后各组PKD1基因mRNA的表达.Western印迹法检测各组A431细胞中PKD1及其磷酸化位点Tyr463蛋白(pTyr463)、Ser916蛋白(pSer916)表达.结果 ALA浓度1.5 mmol/L、光照剂量2 J/cm2为佳剂量组合.4组细胞干预12、24、36、48 h的增殖抑制率差异有统计学意义(F=39.56,P<0.05).孵育24 h时:ALA-PDT组细胞增殖抑制率(46.26%±1.25%)高于ALA组(14.65%±0.33%)、PDT组(14.96%±0.68%)和对照组(11.98%±0.32%),差异有统计学意义(均P<0.05);ALA-PDT组细胞增殖抑制率高于12 h(P< 0.05);4组细胞凋亡率差异有统计学意义(F=16.32,P<0.05),ALA-PDT组(41.92%±3.23%)高于对照组(4.67%±0.88%)、ALA组(7.02%±1.52%)和PDT组(8.37%±0.59%),均P< 0.05.ALA-PDT作用于A431细胞后0、6、12、24、36、48 h,细胞PKD1基因mRNA的相对表达量差异有统计学意义(F=22.24,P<0.05),孵育24 h mRNA相对表达量低于0、6、12h(均P<0.05),与36、48 h差异无统计学意义(均P>0.05).4组A431细胞中pSer916表达量差异无统计学意义(F=1.53,P>0.05),PKD1和pTyr463表达量差异有统计学意义(F值为10.04、8.27,均P< 0.05),ALA-PDT组PKD1、pTyr463的表达低于对照组、ALA组、PDT组(均P<0.05).结论 PKD1可能参与ALA-PDT疗法诱导A431细胞凋亡的光化学反应进程,且可能是通过Tyr463位点活化促进癌变的发展.