期刊简介

               中华医学会主办。本刊辟有述评、专家论坛、论著、短篇论著、新技术与新方法、临床经验、中医中药、皮肤外科、病例报告、皮肤科教程、药物与临床等原创性论文栏目,是了解中国在皮肤性病学预防和治疗、临床和实验研究工作最新进展的窗口。内容丰富,报道及时,具有指导性和实用性。                

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  • 杂志名称:中华皮肤科杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:0412-4030
  • 国内刊号:32-1138/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:2002年获第三届中国科协优秀科技期刊二等奖期刊收录:上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 农业与生物科学研究中心文摘, 国家图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CA 化学文摘(美), 维普收录(中), 万方收录(中)
中华皮肤科杂志2017年第12期

重楼皂苷Ⅰ对人黑素瘤A375细胞增殖和凋亡的影响

龙剑文;罗晶;尹绪文;卫静;贺琪;李恒;石全;皮先明

关键词:黑素瘤, 细胞系, 肿瘤, 细胞凋亡, 活性氧, 细胞增殖, 重楼皂苷Ⅰ
摘要:目的 研究重楼皂苷Ⅰ对人黑素瘤A375细胞增殖和凋亡的影响及相关机制.方法 采用CCK8法测定0(对照组)、1.5、3.0、6.0 mg/L重楼皂苷Ⅰ对正常人黑素细胞和A375细胞增殖的影响;Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡形态;流式细胞仪检测A375细胞周期变化及细胞凋亡水平;荧光染料(DCFH-DA)测定A375细胞内活性氧的变化;罗丹明123染色测定线粒体膜电位变化;利用分光光度法检测重楼皂苷Ⅰ处理后的A375细胞内ATP和上清液中乳酸、葡萄糖含量;Western印迹法检测A375细胞内Bcl-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3、细胞周期蛋白D1、丙酮酸激酶同工酶2(PKM2)表达.多组均数比较采用单因素方差分析,组间多重比较采用SNK-q检验.结果 在工作浓度内重楼皂苷Ⅰ对正常人黑素细胞增殖无明显影响,但能明显抑制A375细胞的增殖(P<0.01);荧光显微镜下发现,重楼皂苷Ⅰ处理后的A375细胞出现明显的凋亡形态.0(对照组)、1.5、3.0、6.0 mg/L重楼皂苷Ⅰ分别处理A375细胞后,随重楼皂苷Ⅰ浓度增加,细胞凋亡率(分别为4.25%±1.27%、10.03%±1.49%、36.62%±1.97%、44.11%±2.47%)逐渐升高(F=665.7,P<0.01),G0/G1期细胞比例(分别为54.13%±2.57%、67.35%±3.79%、74.39%±3.29%、82.29%±3.99%)亦渐增多(F=71.81,P<0.01);细胞内活性氧呈明显上升趋势,细胞线粒体膜电位呈明显下降趋势(P<0.01);细胞内ATP含量下降(P< 0.01),培养液中乳酸含量下降,葡萄糖含量上升(P<0.01);细胞Bax、cleaved-caspase-3蛋白表达增多,但Cyclin D1、Bcl-2和PKM2蛋白表达下降(P<0.01).结论 重楼皂苷Ⅰ可能通过激活细胞内活性氧的产生,引起线粒体膜电位下降,诱导A375细胞凋亡,并通过抑制PKM2、细胞周期蛋白D1表达,使细胞阻滞于G0/G1期.