期刊简介

               中华医学会主办。本刊辟有述评、专家论坛、论著、短篇论著、新技术与新方法、临床经验、中医中药、皮肤外科、病例报告、皮肤科教程、药物与临床等原创性论文栏目,是了解中国在皮肤性病学预防和治疗、临床和实验研究工作最新进展的窗口。内容丰富,报道及时,具有指导性和实用性。                

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  • 杂志名称:中华皮肤科杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:0412-4030
  • 国内刊号:32-1138/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:2002年获第三届中国科协优秀科技期刊二等奖期刊收录:上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 农业与生物科学研究中心文摘, 国家图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CA 化学文摘(美), 维普收录(中), 万方收录(中)
中华皮肤科杂志2016年第12期

过表达RhoD对人黑素瘤A375细胞骨架和迁移侵袭的影响

温斯健;倪娜娜;周晓伟;吴琼;王小坡;宋昊;张韡;孙建方

关键词:黑色素瘤, 实验性, GTP磷酸水解酶类, 细胞骨架, 细胞迁移分析, A375细胞, RhoD
摘要:目的:探讨RhoD对人黑素瘤细胞株A375细胞骨架、迁移和侵袭能力等的影响及作用机制。方法实验分为A375?RhoD组和A375?增强型绿色荧光蛋白(EGFP)组,分别用携带RhoD的慢病毒载体和阴性对照慢病毒载体转染。罗丹明标记鬼笔环肽染色观察细胞骨架,Transwell小室实验检测细胞的迁移和侵袭能力,流式细胞仪检测细胞周期,Western印迹法检测丝切蛋白、磷酸化丝切蛋白、Diaph2和RhoD的表达。结果与A375?EGFP组细胞相比,A375?RhoD组细胞体积增大,应力纤维变细,软弱无力,黏着斑增多;丝状伪足形成增加;皱褶缘和板状伪足无明显变化。Transwell迁移实验显示,A375?EGFP组和A375?RhoD组平均每200倍视野下穿膜细胞数分别为152.67±11.23和72.67±5.03,两组间差异有统计学意义(t =11.25,P <0.05)。Transwell人工基底膜侵袭试验显示,A375?EGFP组和A375?RhoD组平均每200倍视野下穿膜细胞数分别为78.33±12.34和9.00±1,两组间差异有统计学意义(t=9.70,P<0.05)。A375?EGFP和A375?RhoD两组间G1期、S期和G2期细胞所占百分比差异均无统计学意义(P>0.05)。Western印迹结果显示,A375?RhoD组细胞可在RhoD的刺激下激活下游信号效应分子Diaph2,促进其表达,而A375?EGFP组未能激活,两组间丝切蛋白和磷酸化丝切蛋白表达差异不显著。结论 RhoD过表达可能通过下游效应分子Diaph2调节细胞骨架进而抑制A375细胞的迁移和侵袭能力。