期刊简介
中华医学会主办。本刊辟有述评、专家论坛、论著、短篇论著、新技术与新方法、临床经验、中医中药、皮肤外科、病例报告、皮肤科教程、药物与临床等原创性论文栏目，是了解中国在皮肤性病学预防和治疗、临床和实验研究工作最新进展的窗口。内容丰富，报道及时，具有指导性和实用性。
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首页>中华皮肤科杂志
- 杂志名称：中华皮肤科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0412-4030
- 国内刊号：32-1138/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：2002年获第三届中国科协优秀科技期刊二等奖期刊收录：上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 农业与生物科学研究中心文摘, 国家图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CA 化学文摘(美), 维普收录(中), 万方收录(中)
组织蛋白酶 D 绿色荧光蛋白复合质粒转染技术在慢性光损伤成纤维细胞研究中的作用
郑跃；陈海燕；许庆芳；叶聪秀；刘惠娴；易金玲；赖维
关键词：组织蛋白酶 D, 成纤维细胞, 质粒, 细胞衰老, 皮肤衰老, 紫外线
摘要：目的：探讨组织蛋白酶 D 绿色荧光蛋白复合质粒（GFP-CatD）技术在成纤维细胞慢性光损伤研究中的作用。方法长波紫外线（UVA）25 J/cm2每天照射人皮肤成纤维细胞1次，共21 d，构建慢性光损伤成纤维细胞模型。构建 GFP-CatD 质粒，将其转染入慢性光损伤成纤维细胞，荧光显微镜观察绿色荧光标记的组织蛋白酶 D 表达，Western 印迹检测组织蛋白酶 D 表达，流式细胞仪检测转染 GFP-CatD 后的慢性光损伤成纤维细胞凋亡率，噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖率。结果慢性光损伤成纤维细胞转染 GFP-CatD 质粒96 h，可见绿色荧光蛋白组织蛋白酶 D 在慢性光损伤细胞胞质内表达。Western 印迹结果显示，慢性光损伤成纤维细胞转染 GFP-CatD 质粒后，组织蛋白酶 D 蛋白表达为未转染细胞的1.28倍。细胞凋亡检测结果发现，转染后的光老化成纤维细胞凋亡细胞率为4.29％±1.30％，与无转染的空白对照组凋亡细胞率3.03％±1.70％比较，差异无统计学意义（P >0.05）。MTT 细胞增殖检测结果发现，转染后的光老化成纤维细胞的细胞增殖率为45.20％±4.70％，无转染质粒的光老化成纤维细胞为43.60％±3.90％（P >0.05）。结论 GFP-CatD 复合质粒转染慢性光损伤成纤维细胞可示踪到组织蛋白酶 D 荧光蛋白，且不影响慢性光损伤成纤维细胞原有的正常生物活性和周期。
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