期刊简介

               中华医学会主办。本刊辟有述评、专家论坛、论著、短篇论著、新技术与新方法、临床经验、中医中药、皮肤外科、病例报告、皮肤科教程、药物与临床等原创性论文栏目,是了解中国在皮肤性病学预防和治疗、临床和实验研究工作最新进展的窗口。内容丰富,报道及时,具有指导性和实用性。                

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  • 杂志名称:中华皮肤科杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:0412-4030
  • 国内刊号:32-1138/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:2002年获第三届中国科协优秀科技期刊二等奖期刊收录:上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 农业与生物科学研究中心文摘, 国家图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CA 化学文摘(美), 维普收录(中), 万方收录(中)
中华皮肤科杂志2013年第11期

Hsa-mir-634对Vero细胞增殖和凋亡的影响

王颖;樊建勇;杨慧兰

关键词:细胞周期蛋白D1, Vero细胞, 细胞凋亡, 细胞增殖, 疱疹病毒2型, 人, Hsa-mir-634
摘要:目的 探讨hsa-mir-634在Vero细胞中的功能与作用机制.方法 运用生物信息学方法在线预测hsa-mir-634的潜在靶基因细胞周期蛋白D1(CyclinD1,CCND1)的结合位点,将含有hsa-mir-634结合位点的CCND1的3'UTR片段连入psi-CHECK2载体,构建双荧光报告基因载体.通过定点突变的方法突变hsa-mir-634和CCND1的结合位点,构建双荧光报告突变基因载体.将构建的重组质粒转染293T细胞,进行双荧光检测;将化学合成的hsa-mir-634模拟物转染Vero细胞,荧光定量PCR和Western印迹法检测hsa-mir-634对内源性CCND1 mRNA水平和蛋白水平表达的影响,MTS法检测hsa-mir-634对Vero细胞增殖能力的影响,流式细胞仪检测hsa-mir-634对Vero细胞凋亡的影响.结果 用生物信息学方法成功预测到hsa-mir-634与CCND1的结合位点;测序结果显示,野生型及突变型CCND1 3'UTR序列成功连接到psi-CHECK2报告基因载体;双荧光检测结果显示,过表达hsa-mir-634可以抑制荧光素酶的表达.过表达hsa-mir-634后,其靶基因CCND1在mRNA水平上无明显变化,但可以显著影响CCND1蛋白的表达.过表达hsa-mir-634可抑制Vero细胞增殖,这种抑制作用在转染后第4天为明显.另外,过表达hsa-mir-634可诱导Vero细胞的凋亡,空白细胞组、阴性对照组及hsa-mir-634过表达组晚期凋亡的比例分别为8.03%、7.96%和17.33%.结论 Hsa-mir-634通过影响CCND1的表达影响Vero细胞的增殖和凋亡.