期刊简介

               中华医学会主办。本刊辟有述评、专家论坛、论著、短篇论著、新技术与新方法、临床经验、中医中药、皮肤外科、病例报告、皮肤科教程、药物与临床等原创性论文栏目,是了解中国在皮肤性病学预防和治疗、临床和实验研究工作最新进展的窗口。内容丰富,报道及时,具有指导性和实用性。                

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  • 杂志名称:中华皮肤科杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:0412-4030
  • 国内刊号:32-1138/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:2002年获第三届中国科协优秀科技期刊二等奖期刊收录:上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 农业与生物科学研究中心文摘, 国家图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CA 化学文摘(美), 维普收录(中), 万方收录(中)
中华皮肤科杂志2012年第12期

siRNA沉默肾上腺髓质素基因对黑素瘤细胞增殖和凋亡的影响

李志加;孙立新;陆洁;段昕所

关键词:RNA, 小分子干扰, 肾上腺髓质素, 黑色素瘤, 细胞系, 肿瘤, 流式细胞术
摘要:目的 探讨小干扰RNA(siRNA)沉默肾上腺髓质素(ADM)基因对黑素瘤细胞系A375增殖和凋亡的影响.方法 实时荧光定量-PCR(qRT-PCR)检测干扰效果,并选出干扰效果好的siRNA.用筛选出的有效siRNA转染A375细胞为实验组;转染非特异序列的细胞为阴性对照组,未转染的细胞为空白对照组.免疫细胞化学法蛋白水平检测干扰效果;噻唑蓝法(MTT)分别测定沉默ADM基因24、48 h后A375细胞增殖的变化;流式细胞仪(FCM)检测干扰ADM基因48 h后A375细胞的凋亡情况.结果 qRT-PCR显示ADM-siRNA-2干扰效果好.免疫细胞化学结果显示转染ADM-siRNA-2后ADM蛋白的表达显著低于未转染组和阴性对照组.MTT结果显示,转染ADM-siRNA-2的细胞24、48 h吸光度A值为0.389±0.0375,0.469±0.0330,低于空白对照组(0.574±0.0733、0.685±0.0154)和阴性对照组(0.548±0.0376、0.676±0.0374),差异均有统计学意义(P值均<0.05),空白对照组和阴性对照组比较,差异无统计学意义(P值均> 0.05).FCM检测显示转染ADM-siRNA-2组的细胞早期凋亡率为(20.200±6.046)%,高于空白对照组(1.667±0.340)%和阴性对照组(4.587±1.294)%,差异有统计学意义(P值均<0.05),空白对照组和阴性对照组比较,差异无统计学意义(P值均> 0.05).结论 siRNA沉默ADM基因对A375增殖有抑制作用;而对凋亡则有明显促进作用.