期刊简介
中华医学会主办。本刊辟有述评、专家论坛、论著、短篇论著、新技术与新方法、临床经验、中医中药、皮肤外科、病例报告、皮肤科教程、药物与临床等原创性论文栏目，是了解中国在皮肤性病学预防和治疗、临床和实验研究工作最新进展的窗口。内容丰富，报道及时，具有指导性和实用性。
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首页>中华皮肤科杂志
- 杂志名称：中华皮肤科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0412-4030
- 国内刊号：32-1138/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：2002年获第三届中国科协优秀科技期刊二等奖期刊收录：上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 农业与生物科学研究中心文摘, 国家图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CA 化学文摘(美), 维普收录(中), 万方收录(中)
特异性小干扰RNA下调中期因子基因表达对黑素瘤细胞黏附和侵袭的影响
周永静；龚丹丹；邱志远；彭辉勇；范钰
关键词：黑色素瘤, 实验性, 细胞系, 肿瘤, 中期因子, RNA, 小分子干扰
摘要：目的 探讨中期因子(midkine,MK)基因小干扰RNA(siRNA)对黑素瘤细胞侵袭的影响.方法 根据MK基因mRNA序列特点,设计并用化学方法合成3个siRNA,转染人黑素瘤A375细胞后,以荧光实时定量PCR方法筛选出效果好的siRNA,以此siRNA转染人黑素瘤A375细胞.同时设空白对照组(不予任何处理)和空载对照组(仅用脂质体转染).分别以荧光实时定量PCR和Western印迹方法观察MK基因mRNA和蛋白水平,然后以噻唑蓝法检测细胞黏附率,以Boyden小室模型方法检测细胞侵袭力.结果 所设计的siRNA均能有效下调MK基因mRNA表达水平,以S3号作用强.以该siRNA转染A375细胞后,荧光实时定量PCR结果显示,转染组A375细胞MK基因mRNA水平明显下降,且呈浓度(24 h时r=-0.906;48 h时r=-0.922;72 h时r=-0.939,P均<0.01)和时间(3.125 nmol/L r=-0.889;6.25 nmol/L r=-0.935;12.5 nmol/L r=-0.928,P均<0.01)依赖性.细胞黏附试验显示,3.125、6.25和12.5 nmol/L siRNA组黏附率分别为73.66%±2.25%、49.36%±2.16%和28.35%±1.68%,呈浓度依赖性下降(r=-0.936,P<0.01).Boyden小室试验结果显示,3.125、6.25和12.5 nmol/L siRNA组穿过滤膜的细胞数分别为23.9±1.6、12.1±1.5、5.6±1.2,而空白对照组为36.8±1.5,穿膜细胞数呈浓度依赖性下降(r=-0.915,P<0.05).结论 MK基因在黑素瘤细胞黏附、侵袭中发挥重要作用;以siRNA转染黑素瘤细胞抑制该基因表达可抑制黑素瘤细胞黏附、侵袭能力.
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