期刊简介

               中华医学会主办。本刊辟有述评、专家论坛、论著、短篇论著、新技术与新方法、临床经验、中医中药、皮肤外科、病例报告、皮肤科教程、药物与临床等原创性论文栏目,是了解中国在皮肤性病学预防和治疗、临床和实验研究工作最新进展的窗口。内容丰富,报道及时,具有指导性和实用性。                

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  • 杂志名称:中华皮肤科杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:0412-4030
  • 国内刊号:32-1138/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:2002年获第三届中国科协优秀科技期刊二等奖期刊收录:上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 农业与生物科学研究中心文摘, 国家图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CA 化学文摘(美), 维普收录(中), 万方收录(中)
中华皮肤科杂志2009年第10期

SLE患者基因组DNA甲基化水平的检测

朱小华;李锋;陈国梁;杨永生;林尽染;徐金华;项蕾红

关键词:红斑狼疮, 系统性, 后成说, 遗传, DNA甲基化
摘要:目的 构建甲基CpG结合域(MBD)蛋白检测分析SLE患者基因组DNA甲基化水平.方法 将重组表达质粒MBD-pET30b+转化大肠杆菌DH5a克隆扩增并测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21(DE3)后接种于LB培养基中,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白的表达,表达产物包涵体经Ni-NTA亲和层析纯化,通过SDS-PAGE和Western印迹鉴定蛋白表达.用此蛋白免疫染色人胚肾细胞后用荧光显微镜观察、免疫染色正常人(15例)和SLE患者(21例)外周血单核细胞后用流式细胞仪检测平均荧光强度.结果 克隆质粒测序结果与理论预期完全一致,SDS-PAGE显示在大肠杆菌中表达出分子量为46 000的目标蛋白,Western印迹显示目标蛋白带有His融合标签(氨基端)和HA标签(羧基端).荧光显微镜观察显示MBD蛋白能与细胞内的甲基化CpG基序特异性结合,流式细胞仪检测显示SLE患者DNA甲基化水平(9.32±1.33)明显低于正常人(11.66 ±1.04)(P<0.05),SLE患者DNA甲基化水平与SLE-DAI负相关(r=-0.78,P<0.01).结论 SLE患者DNA甲基化水平明显低于正常人.并与SLE-DAI负相关.