期刊简介

               中华医学会主办。本刊辟有述评、专家论坛、论著、短篇论著、新技术与新方法、临床经验、中医中药、皮肤外科、病例报告、皮肤科教程、药物与临床等原创性论文栏目,是了解中国在皮肤性病学预防和治疗、临床和实验研究工作最新进展的窗口。内容丰富,报道及时,具有指导性和实用性。                

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  • 杂志名称:中华皮肤科杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:0412-4030
  • 国内刊号:32-1138/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:2002年获第三届中国科协优秀科技期刊二等奖期刊收录:上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 农业与生物科学研究中心文摘, 国家图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CA 化学文摘(美), 维普收录(中), 万方收录(中)
中华皮肤科杂志2009年第11期

TAP1-EGFP和TAP2-EGFP融合蛋白在恶性黑素瘤细胞系中的表达

李延;陶娟;刘业强;杨井;田分;陆捷洁;涂亚庭

关键词:黑色素瘤, 主要组织相容性复合物, 内质网, 抗原处理相关转运蛋白
摘要:目的 探讨pTAP1-EGFP和(或)pTAP2-EGFP转入恶性黑素瘤细胞株后TAP表达的变化,观察TAP在A375中表达后的业细胞定位.方法 在恶性黑素瘤细胞株A375中转入pTAP1-EGFP和(或)pTAP2-EGFP,G418筛选稳定转染细胞株,检测转染后TAP1和TAP2表达水平的变化.将pDsRed2-ER和pTAP1-EGFP或pTAP2-EGFP共转染入A375细胞内,激光共聚焦显微镜下观察TAP1-EGFP和TAP2-EGFP融合蛋白的亚细胞定位.流式细胞仪检测转染前后细胞表面HIA-Ⅰ的表达.结果 将pTAP1-EGFP和(或)pTAP2-EGFP转染A375细胞株后筛选出稳定克隆.转染pTAP1-EGFP和(或)pTAP2-EGFP后能明显增加A375细胞TAP1和TAP2在蛋白水平的表达,并能增加细胞表面HLA-Ⅰ的表达.共转染pDsRed2-ER和pTAP1-EGFP或pTAP2-EGFP后,在激光共聚焦显微镜下观察,发现TAP1-EGFP和TAP2-EGFP融合蛋白的绿色荧光能够与pDsRed2-ER的红色荧光重叠.结论 构建的pTAP1-EGFP和(或)pTAP2-EGFP质粒在A375细胞系中表达成为TAP1-EGFP和TAP2-EGFP融合蛋白后,能准确定位在内质网上,为研究TAP诱导的后续免疫效应提供基础.